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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
人肝癌組織源細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
人肝癌組織源細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：INE1蛋白抗體 FAM190A蛋白抗體 蛋白激酶Aγ抗體 人睪丸支持細(xì)胞 兔羊膜間質(zhì)細(xì)胞 8505C人甲狀腺癌細(xì)胞 P3X63Ag8 (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：594
更新時(shí)間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
人肝癌組織源細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
肝癌組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7438 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人肝癌組織源分離自患有肝癌病人的肝癌組織；肝癌即肝臟惡性腫瘤，可分為原發(fā)性和繼發(fā)性?xún)纱箢?lèi)。原發(fā)性肝臟惡性腫瘤起源于肝臟的上皮或間葉組織，前者稱(chēng)為原發(fā)性肝癌，是我國(guó)高發(fā)的，危害極大的惡性腫瘤；后者稱(chēng)為肉瘤，與原發(fā)性肝癌相比較較為少見(jiàn)。繼發(fā)性或稱(chēng)轉(zhuǎn)移性肝癌系指全身多個(gè)器官起源的惡性腫瘤侵犯至肝臟。一般多見(jiàn)于胃、膽道、胰腺、結(jié)直腸、卵巢、子宮、肺、乳腺等器官惡性腫瘤的肝轉(zhuǎn)移。原發(fā)性肝癌的病因及確切分子機(jī)制尚不清楚，目前認(rèn)為其發(fā)病是多因素、多步驟的復(fù)雜過(guò)程，受環(huán)境和飲食雙重因素影響。流行病學(xué)及實(shí)驗(yàn)研究資料表明，乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染、、飲水污染、酒精、肝硬化、性激素、亞硝胺類(lèi)物質(zhì)、微量元素等都與肝癌發(fā)病相關(guān)。繼發(fā)性肝癌（轉(zhuǎn)移性肝癌）可通過(guò)不同途徑，如隨血液、淋巴液轉(zhuǎn)移或直接侵潤(rùn)肝臟而形成疾病。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝癌組織源經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 96T/48T
小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 96T/48T
小鼠內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)試劑盒 96T/48T
小鼠內(nèi)毒素(ET)試劑盒 96T/48T
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA Kit 人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)試劑盒
HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 人低分子量細(xì)胞角蛋白(CK-LMW)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Guineapigierleukin4,IL-4試劑盒豚鼠白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次
Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit小鼠酶2(CA-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
內(nèi)皮細(xì)胞清道夫受體抗體
腫瘤蛋白P73抗體
MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
天冬轉(zhuǎn)氨酶(AST)重組蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)
PEBP1重組人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein
CPM Protein Human 重組人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
天冬轉(zhuǎn)氨酶(AST)重組蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)
CPM Protein Human 重組人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白
MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
PEBP1重組人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein
人肝癌組織源細(xì)胞大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)試劑盒 ，英文名： MR ELISA Kit
Mouse thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 小鼠抗復(fù)合物(TAT)試劑盒
MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 小鼠內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanComplemefragme3a,C3aELISAKit人補(bǔ)體片斷3a
細(xì)胞CASEINKINASE1δ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitOFQ/N大鼠孤腓肽
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
