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白介素27ELISA試劑盒的儲存需嚴(yán)格遵循以下要求

日期:2025-11-26瀏覽:165次

  白介素27ELISA試劑盒是一種用于定量檢測樣本中IL-27濃度的試劑盒,基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。其原理是將特異性抗體包被在微孔板(或酶標(biāo)板)上,加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本,樣本中的IL-27會與包被抗體結(jié)合。然后加入生物素化抗體,該抗體會與已結(jié)合的IL-27發(fā)生特異性結(jié)合。接著加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素,生物素與鏈霉親和素會發(fā)生高強(qiáng)度的非共價結(jié)合。最后加入顯色劑底物TMB,若反應(yīng)孔中存在IL-27,則HRP會使無色TMB變成藍(lán)色物質(zhì),加入終止液后反應(yīng)孔會變成黃色。在特定波長下測定反應(yīng)孔的吸光度(OD值),樣本中的IL-27濃度與OD值成正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出樣本中IL-27的濃度。
  白介素27ELISA試劑盒的儲存需嚴(yán)格遵循溫度、避光、防潮及特殊成分處理等要求,具體方法如下:
  一、溫度控制
  核心組分:如標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A/B、96孔板等,需立即保存于-20℃或更低的溫度下,以防止蛋白質(zhì)變性或降解。
  其他試劑:如洗滌液、終止液等,建議保存在4℃的冰箱中,避免冷凍。
  特殊說明:嚴(yán)禁冷凍含甘油或酶標(biāo)抗體的組分,這可能導(dǎo)致蛋白變性,影響試劑性能。
  二、避光防潮
  避光保存:所有試劑需避光保存,尤其是HRP標(biāo)記物和TMB底物。這些試劑對光敏感,長時間暴露于光線下可能導(dǎo)致其活性降低或失效。建議使用鋁箔包裹或棕色瓶存放。
  防潮處理:確保試劑容器密封良好,防止?jié)駳膺M(jìn)入。濕氣可能導(dǎo)致試劑降解和損壞,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在南方高濕地區(qū),建議在試劑盒保存罐內(nèi)放置變色硅膠干燥劑,當(dāng)指示劑由藍(lán)變粉時需立即更換。
  三、特殊成分特殊保存
  標(biāo)準(zhǔn)品:部分標(biāo)準(zhǔn)品可能需要避光或在-20℃以下保存,應(yīng)嚴(yán)格按說明書要求操作。
  分裝保存:對于頻繁使用的試劑盒,建議將酶標(biāo)物按單次用量分裝至0.5mL離心管中,使用封口膜密封管口后置于-20℃避光保存。分裝前需對工作臺進(jìn)行紫外線消毒,操作全程佩戴低溫防護(hù)手套,避免反復(fù)凍融導(dǎo)致蛋白聚合。
  四、確保包裝完整
  保存前要確認(rèn)試劑盒包裝完好無損,若包裝有破損、密封不嚴(yán),應(yīng)及時更換包裝或采取密封措施,防止試劑污染或變質(zhì)。
  五、使用前準(zhǔn)備
  回溫處理:實(shí)驗(yàn)前,將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出,在室溫下平衡15-30分鐘后再使用。這有助于確保試劑溫度與室溫一致,避免因溫度差異影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
  梯度解凍:對于冷凍保存的試劑,應(yīng)采用梯度解凍的方法。例如,將分裝管置于4℃冰箱梯度解凍12小時,禁止室溫快速解凍。解凍后的酶標(biāo)物需在24小時內(nèi)使用完畢,未用完部分應(yīng)當(dāng)廢棄。
 

白介素27ELISA試劑盒

 

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